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介紹下常用的鉬釩酸顯色液都有哪些
更新時間:2019-12-27
鉬釩酸顯色液
是一種將生化反應后產生的復合物顯色以達到實驗目的的一種試劑。一般又稱底物液。
顯色劑有兩類:通用顯色劑和*顯色劑。根據被檢物的化學組成是否遭受破壞,顯色劑分為破壞性顯色劑和非破壞性顯色劑。
在實驗中我們一般將它調配成A,B兩種液體,當需要顯色時就分別加入A,B液,當混合液與實驗中復合物(抗原抗體復合物)反應就會產生顯色效果。
A液一般由:PBS緩沖液,檸檬酸,ED-TA乙二氨四乙酸,ProcLin-300,過氧化氫(過氧化氫揮發(fā)性太高,容易丟失,我們現在正用過氧化脲來代替,效果還不錯)組成。
B液一般由:PBS緩沖液,檸檬酸,ED-TA乙二氨四乙酸,ProcLin-300,硫代硫酸鈉等。
由于鉬釩酸顯色液的反應一旦開始就一直持續(xù)反應,所以,當達到理想效果時一定要終止反映,就需要加入終止液了。
有些生物堿能和某些試劑反應生成特殊的顏色,叫做顯色反應,常用于鑒識某種生物堿。但顯色反應受生物堿純度的影響很大,生物堿愈純,顏色愈明顯。常用的
鉬釩酸顯色液
有:
(1)礬酸銨一濃硫酸溶液(Mandelin試劑)為1%礬酸銨的濃硫酸溶液。如遇阿托品顯紅色。
(2)鉬酸銨一濃硫酸溶液(Frohde試劑)為1%鉬酸鈉或鉬酸銨的濃硫酸溶液,如遇小檗堿顯棕綠色,阿托品不顯色。
(3)甲醛一濃硫酸試劑(Marquis試劑)為30%甲醛溶液0.2ml與10ml濃硫酸的混合溶液。如遇嗎啡顯橙色至紫色。
(4)濃硫酸 如遇小檗堿顯綠色,阿托品不顯色。
(5)濃硝酸 如遇小檗堿顯棕紅色,秋水仙堿顯藍色。
生物堿的顯色反應原理尚不太明了,一般認為是氧化反應、脫水反應、縮合反應或氧化、脫水與縮合的共同反應。
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